Будь умным!


У вас вопросы?
У нас ответы:) SamZan.ru

S.nrod.ru} Приложение Цветные реакции на белки Цветные реакции применяются для установления

Работа добавлена на сайт samzan.ru: 2016-03-13


Белок и всё о нём в биологии и химии {belok-s.narod.ru}

Приложение

Цветные реакции на белки

Цветные реакции применяются для установления белковой природы веществ, идентификации белков и определение их аминокислотного состава в различных биологических жидкостях. В клинической лабораторной практике эти методы используются для определения количества белка в плазме крови, аминокислот в моче и крови, для выявления наследственных и приобретенных патологий обмена у новорожденных.

Биуретовая реакция на пептидную связь.

В основе ее лежит способность пептидных связей (– CONH– )  образовывать с сульфатом меди в щелочной среде окрашенные комплексные соединения, интенсивность окраски которых зависит от длины полипептидной цепи. Раствор белка дает сине-фиолетовое окрашивание.

Реактивы: 1) яичный белок, 1% р-р (белок куриного яйца фильтруют через марлю и разводят дист-ой водой 1:10); 2) NaOH, 10% р-р; 3) Cu(OH)2, 1% р-р.

Ход определения. В пробирку вносят 5 капель р-ра яичного белка, 3 капли NaOH, 1 каплю  Cu(OH)2, перемешивают. Содержимое пробирки приобретает сине-фиолетовое окрашивание.

Нингидриновая реакция.

Сущность реакции состоит в образовании соединения, окрашенного в сине-фиолетовый цвет, состоящего из нингидрина и продуктов гидролиза аминокислот. Эта реакция характерна для аминогрупп в -положении, присутствующих в природных аминокислотах и белках.

Реактивы: 1) яичный белок, 1% р-р; 2) нингидрин, 0,5% водный р-р.

Ход определения. В пробирку вносят 5 капель р-ра яичного белка, затем 5 капель нингидрина, нагревают смесь до кипения. Появляется розово-фиолетовое окрашивание, переходящее с течением времени  в сине-фиолетовое.

Ксантопротеиновая реакция.

При добавлении к р-ру белка конц-ой азотной к-ты и нагревании появляется желтое окрашивание, переходящее в присутствии щелочи в оранжевое. Сущность реакции состоит в нитровании бензольного кольца циклических аминокислот азотной к-ой с образованием нитросоединений, выпадающих в осадок. Реакция выявляет наличие в белке циклических аминокислот.

Реактивы: 1) яичный белок, 1% р-р; 2) конц. азотная к-та; 3)NaOH,10% р-р.

Ход определения. К 5 каплям р-ра яичного белка добавляют 3 капли азотной к-ты и (осторожно!) нагревают. Появляется осадок желтого цвета. После охлаждения добавляют (желательно на осадок) 10 капель NaOH, появляется оранжевое окрашивание.

Реакция Адамкевича.

Аминокислота триптофан в кислой среде, взаимодействуя с альдегидами кислот, образует продукты конденсации красно-фиолетового цвета.

Реактивы: 1) неразбавленные яичный белок; 2) конц. (ледяная) уксусная к-та;  3) конц. серная к-та.

Ход определения. К одной капле белка прибавляют 10 капель уксусной к-ты. Наклонив пробирку, осторожно по стенке добавляют по каплям 0,5 мл серной к-ты так, чтобы жидкости не смешивались. При стоянии пробирки на границе жидкостей появляется красно-фиолетовое кольцо.

Реакция Фоля.

Аминокислоты, содержащие сульфгидрильные группы  – SH, подвергаются щелочному гидролизу с образованием сульфида натрия Na2S. Последний, взаимодействуя с плюмбитом натрия ( образуется в ходе реакции между ацетатом свинца и NaOH), образует осадок сульфида свинца PbS черного или бурого цвета.

Na2S + Na2PbO2 + 2H2O PbS + 4NaOH.

Реактивы: 1) яичный белок, 1% р-р; 2) реактив Фоля ( к 5% -р-ру ацетата свинца прибавляют равный объем 30% р-ра NaOH до растворения образовавшегося осадка).

Ход определения. К 5 каплям р-ра белка прибавляют 5 капель реактива Фоля и кипятят 2-3 мин. После отстаивания 1-2 мин появляется черный или бурый осадок.

PAGE  1




1. приятный и оригинальный подарок для близких людей
2. модульної системи Освітньокваліфікаційний рівень бакалавр Галузь знань 0203 Гуманітарні науки Н
3. Анализ средств коммуникации социальной работы с пожилыми гражданами
4. Феномен игры- ее место и роль в культурной жизни человека и культура ее бытия
5. Контрольная работа- Правила построения авиационных тарифов
6. темах. 6.За оскорбления- личностные по признаку национальной и религиозной принадлежности наказание бан бе
7. а обязательно заплатит за установку нового
8. возбуждение и возбудимость
9. ИЖЕВСКИЙ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ ТЕХНИЧЕСКИЙ УНИВЕРСИТЕТ ИМЕНИ М.
10.  5 ~ С3033 К вопросу о самоорганизации современной молодежи Ключевые слова- ценности атомизация лич
11. Реферат Современные информационные технологии кредитные карточки
12. Статья- Как правильно оформить прием на работу нового сотрудника
13. Александрит
14. ЮжноУральский государственный университет Факультет Физической культуры и спорта Кафедра Адаптив
15. Курсовая работа на тему- Совершенствование трудовой деятельности на основе организации нормирования и опл
16. тематическом непосредственном восприятии и регистрации психологических фактов
17. РАБОЧАЯ ТЕТРАДЬ для практических занятий по биологии
18. приложениях располагается строка заголовка содержащая кроме названия приложения кнопки для выполнения на
19. Волосы мужчины.html
20. тема международных отношений в 194547 годах