Будь умным!


У вас вопросы?
У нас ответы:) SamZan.ru

S.nrod.ru} Приложение Цветные реакции на белки Цветные реакции применяются для установления

Работа добавлена на сайт samzan.ru: 2016-03-13


Белок и всё о нём в биологии и химии {belok-s.narod.ru}

Приложение

Цветные реакции на белки

Цветные реакции применяются для установления белковой природы веществ, идентификации белков и определение их аминокислотного состава в различных биологических жидкостях. В клинической лабораторной практике эти методы используются для определения количества белка в плазме крови, аминокислот в моче и крови, для выявления наследственных и приобретенных патологий обмена у новорожденных.

Биуретовая реакция на пептидную связь.

В основе ее лежит способность пептидных связей (– CONH– )  образовывать с сульфатом меди в щелочной среде окрашенные комплексные соединения, интенсивность окраски которых зависит от длины полипептидной цепи. Раствор белка дает сине-фиолетовое окрашивание.

Реактивы: 1) яичный белок, 1% р-р (белок куриного яйца фильтруют через марлю и разводят дист-ой водой 1:10); 2) NaOH, 10% р-р; 3) Cu(OH)2, 1% р-р.

Ход определения. В пробирку вносят 5 капель р-ра яичного белка, 3 капли NaOH, 1 каплю  Cu(OH)2, перемешивают. Содержимое пробирки приобретает сине-фиолетовое окрашивание.

Нингидриновая реакция.

Сущность реакции состоит в образовании соединения, окрашенного в сине-фиолетовый цвет, состоящего из нингидрина и продуктов гидролиза аминокислот. Эта реакция характерна для аминогрупп в -положении, присутствующих в природных аминокислотах и белках.

Реактивы: 1) яичный белок, 1% р-р; 2) нингидрин, 0,5% водный р-р.

Ход определения. В пробирку вносят 5 капель р-ра яичного белка, затем 5 капель нингидрина, нагревают смесь до кипения. Появляется розово-фиолетовое окрашивание, переходящее с течением времени  в сине-фиолетовое.

Ксантопротеиновая реакция.

При добавлении к р-ру белка конц-ой азотной к-ты и нагревании появляется желтое окрашивание, переходящее в присутствии щелочи в оранжевое. Сущность реакции состоит в нитровании бензольного кольца циклических аминокислот азотной к-ой с образованием нитросоединений, выпадающих в осадок. Реакция выявляет наличие в белке циклических аминокислот.

Реактивы: 1) яичный белок, 1% р-р; 2) конц. азотная к-та; 3)NaOH,10% р-р.

Ход определения. К 5 каплям р-ра яичного белка добавляют 3 капли азотной к-ты и (осторожно!) нагревают. Появляется осадок желтого цвета. После охлаждения добавляют (желательно на осадок) 10 капель NaOH, появляется оранжевое окрашивание.

Реакция Адамкевича.

Аминокислота триптофан в кислой среде, взаимодействуя с альдегидами кислот, образует продукты конденсации красно-фиолетового цвета.

Реактивы: 1) неразбавленные яичный белок; 2) конц. (ледяная) уксусная к-та;  3) конц. серная к-та.

Ход определения. К одной капле белка прибавляют 10 капель уксусной к-ты. Наклонив пробирку, осторожно по стенке добавляют по каплям 0,5 мл серной к-ты так, чтобы жидкости не смешивались. При стоянии пробирки на границе жидкостей появляется красно-фиолетовое кольцо.

Реакция Фоля.

Аминокислоты, содержащие сульфгидрильные группы  – SH, подвергаются щелочному гидролизу с образованием сульфида натрия Na2S. Последний, взаимодействуя с плюмбитом натрия ( образуется в ходе реакции между ацетатом свинца и NaOH), образует осадок сульфида свинца PbS черного или бурого цвета.

Na2S + Na2PbO2 + 2H2O PbS + 4NaOH.

Реактивы: 1) яичный белок, 1% р-р; 2) реактив Фоля ( к 5% -р-ру ацетата свинца прибавляют равный объем 30% р-ра NaOH до растворения образовавшегося осадка).

Ход определения. К 5 каплям р-ра белка прибавляют 5 капель реактива Фоля и кипятят 2-3 мин. После отстаивания 1-2 мин появляется черный или бурый осадок.

PAGE  1




1. Название Социальноэкономические трансформации происходящие в современном российском обществе суще
2. Тема А 1 Осуществление гражданских прав
3. Пояснительная записка Рабочая программа по мировой художественной культуре в 11 классе составлена на осно
4. РЕФЕРАТ дисертації на здобуття наукового ступеня кандидата сільськогосподарських наук.html
5. тематики и физики Кафедра теории и методики информатики Конспект урока по информатике
6. Права на чужие вещи
7. К лабораторной работе 61
8. Выручка, прибыль, их планирование и использование в коммунальном хозяйстве
9. ФИЗИКА Лабораторный практикум
10. Основные источники и виды риска, подлежащие оценке Количественные меры техногенных воздействий и нагрузок
11. экономическое развитие колоний в Северной Америке в XVII ~ п
12. Аксиология не туралызерттейтінілім ~~ндылы~ B ~~дай C т~жірибе D білім E болмыс 6
13. Предмет и методы коммерческого права.html
14. ТЕМА 6 ПРАВООХОРОННА ДІЯЛЬНІСТЬ ОРГАНІВ ДОХОДІВ І ЗБОРІВ УКРАЇНИ лекція 2 години
15. Курсовая работа- Гарантии местного самоуправления
16. то из ее блюд. Но особое место во всей кухне Тайланда играют супы которых существует великое множество
17. Московское хлебосольство
18. Тема ’ 7- Реформирование и деятельность органов внутренних дел Советского государства 1945 1991 гг.html
19. Курсовая работа- Учет безналичных расчетов
20. О национальнокультурной автономии